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<p>Markierung mit stabilen Isotopen (SI:=13C, 15N) entwickelt sich immer mehr zu einer allgemein in der Biologie, Pharmazie und Medizin akzeptierten Markierungs-Methode, weil durch stabile Isotope die Funktion der Biomoleküle nicht beeinträchtigt wird. In diesem Vorhaben werden metabolische Markierungsmethoden für Anwendungen in der NMR-Strukturbiologie und quantitativen Proteomik weiter verfeinert mit folgenden Zielen: (a) Entwicklung eines Mediums für Säugetier-Zellkulturmedien zur Herstellung von SI-markierten Säugetier-Proteinen, die mit einfacheren Expressionssystemen nicht herstellbar sind (für NMR); (b) Konstruktion von Corynebakterium glutamicum-Mutanten zur Herstellung von Aminosäuren bzw. Aminosäurevorläufern wie Glutaminund Diaminopimelat (DAP) für spezifische Protein-Markierungen; (c) Entwicklung der in vitro Amidierung von Glutamat und Aspartat (mit Hilfe von Glutamin- und Aspargin-Synthetase produzierenden Mutanten); (d) der Entwicklung von Corynebakterium glutamicum-Mutanten, die Stärke statt Glucose metabolisieren können. Ziel ist es, mit dieser kostengünstiger herstellbaren 13C-Kohlenstoffquelle die Kosten für 13C-Markierung der Aminosäuren zu reduzieren.<br></p>
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Biosynthetischer Ansatz zur Herstellung stabil isotopenmarkierter (SI:=13C,15N) Aminosäuren und Aminosäurevorläufer: Markierungen von Säuger-Zellkulturen
Übersicht
Dauer:
Dauerhaft:
International:
Links:
Förderkennzeichen:
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Projektträger:
Projektförderung:
- Bundesministerium für Wirtschaft und Klimaschutz
Schlagworte:
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Mittelgeber:
Projektbeschreibung
Kurzzusammenfassung
Markierung mit stabilen Isotopen (SI:=13C, 15N) entwickelt sich immer mehr zu einer allgemein in der Biologie, Pharmazie und Medizin akzeptierten Markierungs-Methode, weil durch stabile Isotope die Funktion der Biomoleküle nicht beeinträchtigt wird. In diesem Vorhaben werden metabolische Markierungsmethoden für Anwendungen in der NMR-Strukturbiologie und quantitativen Proteomik weiter verfeinert mit folgenden Zielen: (a) Entwicklung eines Mediums für Säugetier-Zellkulturmedien zur Herstellung von SI-markierten Säugetier-Proteinen, die mit einfacheren Expressionssystemen nicht herstellbar sind (für NMR); (b) Konstruktion von Corynebakterium glutamicum-Mutanten zur Herstellung von Aminosäuren bzw. Aminosäurevorläufern wie Glutaminund Diaminopimelat (DAP) für spezifische Protein-Markierungen; (c) Entwicklung der in vitro Amidierung von Glutamat und Aspartat (mit Hilfe von Glutamin- und Aspargin-Synthetase produzierenden Mutanten); (d) der Entwicklung von Corynebakterium glutamicum-Mutanten, die Stärke statt Glucose metabolisieren können. Ziel ist es, mit dieser kostengünstiger herstellbaren 13C-Kohlenstoffquelle die Kosten für 13C-Markierung der Aminosäuren zu reduzieren.

